2025-09-18 02:06:41
在(zai)(zai)(zai)(zai)(zai)生(sheng)(sheng)物技術的(de)(de)(de)(de)(de)(de)微觀(guan)(guan)世界(jie)中(zhong)(zhong)(zhong),限制性核酸內(nei)切(qie)酶是基(ji)(ji)因工程(cheng)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)關鍵工具(ju)之一(yi)(yi)(yi),而(er) AluI 則是其中(zhong)(zhong)(zhong)一(yi)(yi)(yi)位“微雕大(da)師”。它以(yi)其獨特的(de)(de)(de)(de)(de)(de)識(shi)別序列和(he)切(qie)割(ge)方(fang)式,在(zai)(zai)(zai)(zai)(zai)基(ji)(ji)因工程(cheng)、分(fen)子生(sheng)(sheng)物學(xue)研究(jiu)以(yi)及(ji)遺(yi)傳學(xue)等領域發揮著重(zhong)(zhong)要作用。AluI 的(de)(de)(de)(de)(de)(de)識(shi)別序列是“AG^CT”,這一(yi)(yi)(yi)序列在(zai)(zai)(zai)(zai)(zai)基(ji)(ji)因組(zu)中(zhong)(zhong)(zhong)相對常見,使得(de) AluI 能(neng)(neng)夠在(zai)(zai)(zai)(zai)(zai)多個(ge)位點進行切(qie)割(ge)。它會在(zai)(zai)(zai)(zai)(zai)識(shi)別到該序列后(hou),在(zai)(zai)(zai)(zai)(zai)“^”標記的(de)(de)(de)(de)(de)(de)位置將 DNA 鏈切(qie)斷(duan)(duan),產生(sheng)(sheng)黏(nian)性末端(duan)。這種(zhong)切(qie)割(ge)方(fang)式使得(de) AluI 在(zai)(zai)(zai)(zai)(zai)基(ji)(ji)因克隆和(he)重(zhong)(zhong)組(zu) DNA 構(gou)建中(zhong)(zhong)(zhong)具(ju)有(you)獨特的(de)(de)(de)(de)(de)(de)優勢。在(zai)(zai)(zai)(zai)(zai)基(ji)(ji)因工程(cheng)中(zhong)(zhong)(zhong),AluI 的(de)(de)(de)(de)(de)(de)應(ying)用極為廣。科(ke)(ke)學(xue)家可以(yi)利(li)用它將目標基(ji)(ji)因從復雜的(de)(de)(de)(de)(de)(de)基(ji)(ji)因組(zu)中(zhong)(zhong)(zhong)精(jing)細地分(fen)離出(chu)來,再通(tong)過(guo) DNA 連接酶將切(qie)割(ge)后(hou)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)基(ji)(ji)因片段與載體(ti) DNA 連接起來,構(gou)建出(chu)能(neng)(neng)夠高效表達目標蛋白的(de)(de)(de)(de)(de)(de)重(zhong)(zhong)組(zu)載體(ti)。這一(yi)(yi)(yi)過(guo)程(cheng)不僅需(xu)要精(jing)細的(de)(de)(de)(de)(de)(de)切(qie)割(ge),還需(xu)要切(qie)割(ge)后(hou)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)片段能(neng)(neng)夠完美匹配,而(er) AluI 的(de)(de)(de)(de)(de)(de)黏(nian)性末端(duan)特性正好滿(man)足了這一(yi)(yi)(yi)需(xu)求(qiu)。AluI 的(de)(de)(de)(de)(de)(de)另一(yi)(yi)(yi)個(ge)重(zhong)(zhong)要應(ying)用是基(ji)(ji)因分(fen)析。通(tong)過(guo)觀(guan)(guan)察 AluI 對不同 DNA 樣本的(de)(de)(de)(de)(de)(de)切(qie)割(ge)模式,科(ke)(ke)學(xue)家可以(yi)分(fen)析基(ji)(ji)因的(de)(de)(de)(de)(de)(de)多態性,進而(er)推(tui)斷(duan)(duan)出(chu)基(ji)(ji)因的(de)(de)(de)(de)(de)(de)結構(gou)和(he)功能(neng)(neng)差異。這種(zhong)技術在(zai)(zai)(zai)(zai)(zai)遺(yi)傳病診斷(duan)(duan)和(he)基(ji)(ji)因多樣性研究(jiu)中(zhong)(zhong)(zhong)具(ju)有(you)重(zhong)(zhong)要意義。例如,在(zai)(zai)(zai)(zai)(zai)某些遺(yi)傳病的(de)(de)(de)(de)(de)(de)研究(jiu)中(zhong)(zhong)(zhong),AluI 可以(yi)用來檢測基(ji)(ji)因突變,幫助科(ke)(ke)學(xue)家更(geng)好地理解疾病的(de)(de)(de)(de)(de)(de)遺(yi)傳機制。Endo H 相對比較嬌(jiao)貴,需(xu)要在(zai)(zai)(zai)(zai)(zai)特定(ding)的(de)(de)(de)(de)(de)(de)條件下(xia)保存才能(neng)(neng)保持其活性,一(yi)(yi)(yi)般需(xu)要在(zai)(zai)(zai)(zai)(zai) - 20℃或更(geng)低溫度下(xia)保存。Recombinant Human CPM Protein,His Tag
重(zhong)組(zu)人Siglec-4a(亦稱(cheng)髓(sui)鞘(qiao)相(xiang)關(guan)糖(tang)蛋(dan)白(bai)(bai)MAG)胞(bao)外區(Ser17-Gly516)經HEK293表(biao)達,C端融合hFc-Avi雙標(biao)簽(qian)(qian),分(fen)子量約80 kDa,純度(du)≥97%(SEC-HPLC),內素<0.03 EU/μg。Siglec-4a專一識別神經軸(zhou)突(tu)(tu)表(biao)面α2,3-連接唾液酸,通(tong)過ITIM基序抑制神經元過度(du)啟動,在髓(sui)鞘(qiao)形成、軸(zhou)突(tu)(tu)維持及神經損(sun)傷后免(mian)疫逃(tao)逸中(zhong)起“制動器”作(zuo)用。本品Fc段(duan)支持標(biao)準ELISA、免(mian)疫沉(chen)淀與細胞(bao)結合實驗(yan);Avi標(biao)簽(qian)(qian)可在15 min內被BirA酶定量生物素化(hua),生成定向固(gu)定的(de)(de)(de)表(biao)面探針,用于SPR精確測定抗體(ti)(ti)或(huo)糖(tang)肽拮抗劑的(de)(de)(de)親和力(KD低至pM級)。體(ti)(ti)外髓(sui)鞘(qiao)-軸(zhou)突(tu)(tu)共(gong)培(pei)養體(ti)(ti)系中(zhong),重(zhong)組(zu)Siglec-4a能劑量依賴地抑制小(xiao)膠質細胞(bao)吞噬,為研究多發(fa)性(xing)硬化(hua)、吉蘭-巴雷(lei)綜(zong)合征及脊髓(sui)損(sun)傷提供(gong)可靠(kao)功能工(gong)具。凍(dong)干粉(fen)4℃一周穩定,-80℃長期(qi)保存,每批次附(fu)唾液酸結合驗(yan)證報告(gao),是神經免(mian)疫互作(zuo)與再髓(sui)鞘(qiao)藥物高通(tong)量篩選的(de)(de)(de)關(guan)鍵試劑。Recombinant Human CPM Protein,His Tag去泛素化(hua)酶(Deubiquitinating enzymes, DUBs)可以去除泛素化(hua)蛋(dan)白(bai)(bai)上的(de)(de)(de)泛素鏈,使泛素分(fen)子得以回收(shou)和再利用。
重(zhong)組(zu)(zu)人LGR-5蛋白(bai)(bai)(Recombinant Human LGR-5 Protein, hFc Tag)是(shi)一種重(zhong)要(yao)(yao)的(de)(de)G蛋白(bai)(bai)偶聯受體(ti)(GPCR),屬于富含亮氨酸重(zhong)復序列的(de)(de)GPCR家族成員,廣表(biao)達于多(duo)(duo)種組(zu)(zu)織干細(xi)胞(bao)(bao)(bao)表(biao)面,尤(you)其在腸(chang)(chang)道隱窩、胃(wei)腺體(ti)及(ji)囊干細(xi)胞(bao)(bao)(bao)中高(gao)表(biao)達。LGR-5(Leucine-rich repeat-containing G-protein coupled receptor 5)是(shi)干細(xi)胞(bao)(bao)(bao)維持(chi)(chi)、組(zu)(zu)織再生(sheng)(sheng)及(ji)病發生(sheng)(sheng)過程(cheng)中的(de)(de)關鍵(jian)標(biao)(biao)志物。該(gai)重(zhong)組(zu)(zu)蛋白(bai)(bai)采用(yong)真(zhen)核表(biao)達系統(如(ru)HEK293細(xi)胞(bao)(bao)(bao))制備(bei),確保了其天然構象(xiang)和(he)生(sheng)(sheng)物活性(xing)(xing)。其C端融合了人IgG Fc(hFc)標(biao)(biao)簽,不(bu)(bu)僅提(ti)高(gao)了蛋白(bai)(bai)的(de)(de)穩定性(xing)(xing)和(he)溶(rong)解(jie)性(xing)(xing),還便于通過Protein A親和(he)層(ceng)析進行高(gao)效純化(hua)。此(ci)外,hFc標(biao)(biao)簽還可用(yong)于免疫(yi)共沉淀(dian)、流式細(xi)胞(bao)(bao)(bao)術及(ji)體(ti)內功(gong)能研究(jiu)等實驗。研究(jiu)表(biao)明,LGR-5在腸(chang)(chang)道干細(xi)胞(bao)(bao)(bao)維持(chi)(chi)、組(zu)(zu)織穩態(tai)及(ji)病干細(xi)胞(bao)(bao)(bao)特性(xing)(xing)中具有(you)重(zhong)要(yao)(yao)作用(yong)。其表(biao)達異常與結(jie)直腸(chang)(chang)病、胃(wei)病等多(duo)(duo)種病的(de)(de)發長(chang)發展(zhan)密(mi)切相(xiang)(xiang)關。因(yin)此(ci),重(zhong)組(zu)(zu)人LGR-5蛋白(bai)(bai)不(bu)(bu)僅是(shi)研究(jiu)干細(xi)胞(bao)(bao)(bao)生(sheng)(sheng)物學及(ji)病機制的(de)(de)重(zhong)要(yao)(yao)工具,也為(wei)開發相(xiang)(xiang)關疾病的(de)(de)治(zhi)策略提(ti)供了有(you)力支持(chi)(chi),具有(you)重(zhong)要(yao)(yao)的(de)(de)科研和(he)臨床(chuang)應(ying)用(yong)價值。
SERPINF2(α2-抗纖(xian)溶(rong)(rong)酶(mei))是血(xue)(xue)漿中(zhong)只(zhi)有能(neng)不(bu)可逆抑(yi)制(zhi)纖(xian)溶(rong)(rong)酶(mei)的(de)內(nei)(nei)(nei)源性絲氨酸蛋(dan)(dan)白(bai)酶(mei)抑(yi)制(zhi)劑,其(qi)缺(que)失導致罕見出(chu)血(xue)(xue)性疾病α2-AP缺(que)乏癥。本品以HEK293真核(he)系統表達全(quan)(quan)長成熟蛋(dan)(dan)白(bai)(aa 27-491),保留天然N-糖基化(hua)(hua)與活性中(zhong)心,C端(duan)6×His標簽(qian)經Ni-NTA與肝素(su)親和兩步(bu)純(chun)化(hua)(hua),SDS-PAGE呈單一(yi)條帶,純(chun)度(du)≥99%;內(nei)(nei)(nei)素(su)<0.01 EU/μg,可直(zhi)接用(yong)于小(xiao)鼠體內(nei)(nei)(nei)實驗(yan)(yan)。功能(neng)驗(yan)(yan)證顯(xian)示,其(qi)與纖(xian)溶(rong)(rong)酶(mei)1:1結(jie)合,二級速(su)率(lv)常數(shu)k?=4.2×10? M??s??,100 nM即可完(wan)(wan)全(quan)(quan)抑(yi)制(zhi)10 nM纖(xian)溶(rong)(rong)酶(mei)對熒(ying)光底物的(de)水(shui)解;在尾靜脈剪斷模型中(zhong),0.5 mg/kg重組蛋(dan)(dan)白(bai)可將野生型小(xiao)鼠出(chu)血(xue)(xue)時間縮短55%,對SERPINF2?/?小(xiao)鼠實現完(wan)(wan)全(quan)(quan)止血(xue)(xue)。His標簽(qian)兼容SPR、ELISA及(ji)表面等(deng)離子共振,可實時監(jian)測與纖(xian)溶(rong)(rong)酶(mei)原、tPA的(de)動態互(hu)作,助力α2-AP缺(que)乏基因療(liao)法與溶(rong)(rong)栓藥(yao)物劑量(liang)優化(hua)(hua)。該蛋(dan)(dan)白(bai)為(wei)解析(xi)纖(xian)溶(rong)(rong)調控網絡(luo)、開發出(chu)血(xue)(xue)與血(xue)(xue)栓雙向干預策略提供了高(gao)(gao)活性、標準化(hua)(hua)的(de)研究級試劑。Taq DNA Polymerase 能(neng)夠在相對較高(gao)(gao)的(de)溫度(du)下保持穩(wen)定(ding),其(qi)適催化(hua)(hua)溫度(du)在75-80°C。
分(fen)泌型(xing)卷曲(qu)相(xiang)關蛋白2(SFRP2)是Wnt通(tong)路(lu)的(de)天(tian)然拮抗劑(ji)(ji),亦(yi)能(neng)以非經典方式促進血管生成(cheng)與(yu)膠原成(cheng)熟,在心肌梗死修復、病基質重塑(su)及干細胞微(wei)環境(jing)維(wei)持中扮演“雙向調(diao)(diao)音師”。本品由(you)(you)HEK293真核分(fen)泌表達,完(wan)整覆蓋信號肽至Netrin樣結構域(aa 1-295),C端6×His標(biao)(biao)簽經Ni-NTA與(yu)凝膠過濾兩步(bu)純化(hua)(hua),SDS-PAGE呈(cheng)單一(yi)條帶,純度(du)≥98%;內(nei)素<0.03 EU/μg,可(ke)直接(jie)用于小(xiao)鼠皮下或(huo)(huo)心肌注(zhu)射。功(gong)能(neng)驗(yan)證:SPR測定(ding)其(qi)與(yu)Wnt3a的(de)抑制常數Ki=4.6 nM,100 ng/mL即(ji)可(ke)阻斷(duan)β-catenin核轉位;在HUVEC管腔形成(cheng)實(shi)驗(yan)中,50 ng/mL重組SFRP2將總(zong)管長提升2.1倍,提示血管生成(cheng)活性。His標(biao)(biao)簽兼容(rong)ELISA、BLI與(yu)免疫組化(hua)(hua),可(ke)定(ding)量(liang)(liang)檢測病間質或(huo)(huo)損(sun)傷心肌中SFRP2水平(ping),亦(yi)可(ke)固定(ding)于芯片(pian)高通(tong)量(liang)(liang)篩選Wnt通(tong)路(lu)調(diao)(diao)節劑(ji)(ji)。該蛋白為解析(xi)Wnt微(wei)環境(jing)信號、開(kai)發促修復或(huo)(huo)抗病組合療(liao)法提供了(le)高活性、標(biao)(biao)準化(hua)(hua)的(de)研究(jiu)級試劑(ji)(ji)。泛素分(fen)子可(ke)以通(tong)過其(qi)內(nei)部(bu)的(de)賴氨酸殘(can)基與(yu)其(qi)他泛素分(fen)子形成(cheng)多聚泛素鏈,這一(yi)步(bu)驟通(tong)常由(you)(you)E3酶催化(hua)(hua)。Recombinant Human CPM Protein,His Tag
當(dang) AgeI 識別到這(zhe)一特定序(xu)列時,它會在“^”標記的(de)位置將 DNA 鏈切斷。Recombinant Human CPM Protein,His Tag
重(zhong)組人(ren)TIM-1蛋(dan)白(bai)(bai)(bai)是一種在(zai)哺乳(ru)動物細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)中(zhong)表達(da)(da)的(de)(de)重(zhong)組蛋(dan)白(bai)(bai)(bai),融合(he)(he)了hFc標(biao)(biao)簽,便于(yu)純(chun)化和(he)檢測。TIM-1(T細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)免(mian)疫(yi)球蛋(dan)白(bai)(bai)(bai)和(he)黏蛋(dan)白(bai)(bai)(bai)結(jie)構(gou)域蛋(dan)白(bai)(bai)(bai)1)是一種共刺激分子,主要(yao)表達(da)(da)于(yu)T細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)、B細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)、樹突狀(zhuang)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)和(he)某些(xie)非免(mian)疫(yi)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)表面,廣(guang)參(can)與(yu)(yu)免(mian)疫(yi)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)的(de)(de)啟動、增殖和(he)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)因子分泌,在(zai)免(mian)疫(yi)調(diao)(diao)節和(he)過敏反(fan)應中(zhong)發揮重(zhong)要(yao)作(zuo)用(yong)。TIM-1的(de)(de)功(gong)能(neng)與(yu)(yu)機制TIM-1通(tong)過其胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)外區(qu)的(de)(de)Ig樣結(jie)構(gou)域與(yu)(yu)配(pei)體(ti)(ti)(如(ru)TIM-4)結(jie)合(he)(he),傳遞啟動信(xin)號,促進(jin)T細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)的(de)(de)增殖和(he)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)因子分泌。TIM-1的(de)(de)信(xin)號轉導(dao)依賴于(yu)其胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)內段的(de)(de)免(mian)疫(yi)受體(ti)(ti)酪氨酸啟動基序(ITAM),啟動后可招募多種信(xin)號分子,如(ru)Syk和(he)PI3K,進(jin)而調(diao)(diao)節免(mian)疫(yi)反(fan)應。此(ci)外,TIM-1在(zai)過敏反(fan)應中(zhong)也發揮關(guan)鍵作(zuo)用(yong),其高表達(da)(da)與(yu)(yu)過敏病、特應性皮炎(yan)等疾病密切相(xiang)關(guan)。TIM-1還(huan)參(can)與(yu)(yu)調(diao)(diao)節免(mian)疫(yi)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)的(de)(de)黏附和(he)遷移,影響免(mian)疫(yi)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)在(zai)炎(yan)癥部位(wei)的(de)(de)浸(jin)潤。重(zhong)組人(ren)TIM-1蛋(dan)白(bai)(bai)(bai)(hFc Tag)的(de)(de)特點(dian)重(zhong)組人(ren)TIM-1蛋(dan)白(bai)(bai)(bai)(hFc Tag)具有以下(xia)明顯特點(dian):高純(chun)度(du):純(chun)度(du)≥95%(經SDS-PAGE和(he)SEC-HPLC驗證),確保實(shi)驗結(jie)果的(de)(de)可靠(kao)性。低內素(su):內素(su)水平<0.1 EU/μg,適合(he)(he)用(yong)于(yu)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)(bao)實(shi)驗和(he)體(ti)(ti)內研究(jiu)。功(gong)能(neng)完整:保留了天然(ran)TIM-1的(de)(de)配(pei)體(ti)(ti)結(jie)合(he)(he)位(wei)點(dian)和(he)信(xin)號轉導(dao)功(gong)能(neng)。hFc標(biao)(biao)簽:便于(yu)通(tong)過抗(kang)人(ren)IgG抗(kang)體(ti)(ti)進(jin)行檢測和(he)免(mian)疫(yi)沉淀實(shi)驗。 Recombinant Human CPM Protein,His Tag